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| (技術人員採集鱟血中) |
俗話說，每個成功的男人，背後都有一位傑出且付出的女人。而每一次成功的細胞療法，背後都有一群『鱟』幫我們把關。
細胞產品必須無菌，但卻不可以消毒或滅菌
生活周遭到處都有細菌。所以任何會接觸到傷口，或進入人體的醫療用品和注射針劑，都必須無菌才可以。否則輕則讓人發燒與感染，重則令人死亡。
即使是微小的棉花棒或注射用水，原料雖然不是無菌狀態，但只要從工廠出貨前，產品經過最終滅菌 (高溫滅菌、紫外線滅菌、臭氧滅菌…等) 處理並且通過無菌測試，就能夠放行。
但是，活細胞製成的產品或針劑，可無法加熱滅菌，一加熱細胞就死囉。因此打從製程的第一步，所有的東西都必須是無菌狀態。所以細胞產品對於生產環境的要求，可是比醫材或針劑高出許多。
但產品即使無菌，仍可能導致人體發燒
外毒素是細菌分泌到菌體外的毒性物質，例如肉毒桿菌素。雖然對人體有害，但外毒素大部分是蛋白質組成，因此加熱滅菌時它的活性也會被移除。
而脂多醣 (lipopolysaccharide; LPS) 不但是革蘭氏陰性菌的細胞壁主要成分，也是一種內毒素。細菌死亡或破裂後，LPS 會被釋放出來；因此內毒素在自然界到處都有，包含了自來水、空氣，甚至是食物當中。
當 LPS 進入人體血液後，會造成人類嚴重的發燒、凝血、休克。但 LPS 不是蛋白質，即使用 100℃ 高溫加熱一小時也不受影響；必須用 160℃ 加熱 2~4 小時，或使用強鹼、強酸或強氧化劑加溫煮沸30分鐘，才能破壞它的生物活性。
而細胞培養過程中，若使用的水或塑膠耗材帶有 LPS，那麼製成的細胞產品即使無菌，但可能帶有 LPS。注射到病患身上後，可能引起發燒或其他健康風險。
因此在細胞產品出廠前，內毒素檢測是十分重要且必須執行的安全性試驗項目之一。
內毒素檢測，早期利用家兔，後來用鱟血
在過去，藥廠利用家兔來確認注射輸液或包材是否含有會讓病患發燒的「熱原物質」。方法是把產品注射到家兔體內，觀察兔子是否產生發燒反應，又稱熱原試驗。
這種試驗方式全程都必須把兔子固定住，讓它無法行動。但兔子仍可能因為緊張或掙扎導致體溫上升，因此實驗不但不精準，且非常不人道。
後來科學家找到了替代方案。這次倒楣的是鱟魚，一種比恐龍還古老的活化石動物。
鱟魚的血遇到 LPS 會產生凝集反應，因此科學家將鱟魚血加工做成內毒素檢測試劑。由於檢測十分靈敏且操作方便，這種試劑 (LAL, Limulus Amebocyte Lysate) 成為最普遍且受歡迎的內毒素試劑，廣泛使用於藥物、生物製品及醫療器材等的內毒素檢測。
鱟血試驗又稱「細菌內毒素試驗」，在 1980 年就被收錄於美國藥典。隨後英、德、意、日以及中國相繼在藥典中收載了這一檢查法。此後鱟血試驗逐漸替代家兔熱原試驗。
但鱟血試驗只能檢測內毒素，但無法檢測 LPS 以外的熱原，例如革蘭氏陽性菌、病毒、黴菌…，因此無法全面取代家兔試驗。
但採鱟血，可能會加速鱟魚絕種
鱟魚又叫馬蹄蟹、夫妻魚。目前全世界有 4 種鱟，多分佈於美國東海岸與亞洲東海岸；台灣的金門、澎湖沿岸及嘉義也有分布。
生技公司取鱟血做成內毒素檢測試劑。但由於養殖技術還不成熟，現在鱟最大的來源仍然是野外。野生鱟被捕捉、上架、抽血後，就被野放。
鱟魚血是藍色的，市價高達 50 萬台幣，有「藍血」之稱。所以有部分不肖廠商會選擇把鱟血抽乾，並將死去的鱟魚賣到餐廳，謀取更多的獲利。
即使抽完血後被野放回大海，根據調查有 10% 到 25% 的鱟，仍會在遭到大量抽血後的幾天內死亡。
因此鱟魚的野外數量與處境，是越來越嚴峻。
鱟血試劑好貴又不耐放，卻是必要之惡
一瓶鱟血試劑好幾千元，最多只能檢測 3 個檢體；而且開封後若沒使用完，最多也只能解凍一次或 7 天內用完。所以內毒素檢測一直是成本很高的檢測項目。
對於細胞療法中使用的細胞產品，整個生產製程都必須無菌，且實驗室會透過「無菌試驗」檢測，確保產品未遭受細菌汙染；但生產過程使用的儀器耗材仍可能受到 LPS 汙染，因此內毒素檢測是不可以少的。
任何要注射到人體、血管內的東西，務必用最高安全標準來把關！
MAT熱原檢測法或許是個好的替代方案
家兔與鱟血，目前仍是最常見的熱原試驗方法。而鱟血試劑更是全球主流的內毒素檢測法，短時間內在醫藥領域中仍難以被取代。
但為了符合減少動物試驗的需求與趨勢，新的取代方案仍有需要。
既然是偵測會導致人體發燒的熱原物質，比起家兔或鱟血，用人血更能反應人體的發燒機制。因此科學家利用這個原理開發出以人類血液為模式的熱原試驗法 ─ MAT (Monocyte Activation Test)，又稱 WBT (Whole Blood Test)。
2010 年時，歐洲藥典（European Pharmacopoeia）已正式收錄五種人血熱原試驗模式。而台灣在 2013 年時，也在中華藥典第七版的通則中收錄了 MAT 試驗法。
採用 MAT 法時，實驗室或工廠必須提出佐證，證明 MAT 法適合用於自家的產品，且結果可以取代家兔或 LAL test。以實驗室的角度來說，確實是增加了許多麻煩。但這確實是符合減少動物實驗的全球趨勢。
延伸閱讀：實驗兔、實驗鱟 痛苦、犧牲無人知－－以學名藥為例，檢視台灣不必要的實驗動物犧牲
全球鱟魚的野生數量日益稀少。在台灣本島鱟幾乎已經絕跡，而金門的野生鱟魚數量也正在減少，故學者們不斷呼籲政府將鱟魚列為保育類動物。
當我們在關心細胞療法的最新發展時，也別忘了在後面默默守護我們的鱟魚，和牠們日趨嚴重的生存壓力。
結論
全球鱟魚的野生數量日益稀少。在台灣本島鱟幾乎已經絕跡，而金門的野生鱟魚數量也正在減少，故學者們不斷呼籲政府將鱟魚列為保育類動物。
當我們在關心細胞療法的最新發展時，也別忘了在後面默默守護我們的鱟魚，和牠們日趨嚴重的生存壓力。
